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胎牛血清有必要做熱滅活嗎?為什么要熱滅活胎牛血清?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞、平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。有必要做熱滅活嗎?實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活胎牛血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡...
2016 6-28
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培養(yǎng)基生產(chǎn)和使用常見問題培養(yǎng)基生產(chǎn)和使用常見問題:1.低血清培養(yǎng)基能用肉眼判斷其pH值嗎?答:低血清培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。2.低血清培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)是什么?答:平衡鹽一般是由無機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統(tǒng)、Earle′s系統(tǒng)、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統(tǒng)等。199系列培養(yǎng)基、MEM系列培養(yǎng)基均有Hanks′系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle′s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。但是有些培養(yǎng)基均不是以上常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),...
2016 6-27
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胰酶貼壁細胞的消化胰酶是自豬胰中提取的多種酶的混合物,主要為胰蛋白酶、胰淀粉酶與胰脂肪酶。按干燥品計算,每1g中含胰蛋白酶不得少于1800活力單位,胰淀粉酶不得少于21000活力單位,胰脂肪酶不得少于12000活力單位。必要時可用蔗糖或低倍胰酶稀釋。胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。在中性或弱堿性條件下活性較強,胰蛋白酶能使蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為蛋白胨,胰淀粉酶能使淀粉轉(zhuǎn)化為糖,胰脂肪酶則能使脂肪分解為甘油及脂肪酸,從而促進消化、增進食欲。主要用于消化不良,食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障礙...
2016 6-23
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細胞培養(yǎng)基的基本知識 細胞培養(yǎng)基的基本知識培養(yǎng)細胞的*培養(yǎng)基由基礎培養(yǎng)基(如MEM)和添加劑(如血清或無血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長因子)組成,培養(yǎng)基的配方一直在改進,其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。一、基礎培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機鹽和代謝添...
2016 5-20
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無血清培養(yǎng)基的介紹無血清培養(yǎng)基的介紹經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細胞培養(yǎng)的要求,但對有些實驗卻不適合,如觀察一種生長因子對某種細胞的作用,這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種...
2016 5-17
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無血清培養(yǎng)基及應用無血清培養(yǎng)基專門用來在無血清條件下培養(yǎng)特殊類型的細胞或進行特殊應用。無血清培養(yǎng)基的使用展現(xiàn)了一種重要的培養(yǎng)方法:允許細胞培養(yǎng)在一套限定條件下進行,盡可能避免受到干擾參數(shù)的影響。使用無血清培養(yǎng)的優(yōu)點:1.增加確定性。2.性能更加一致。3.容易進行純化和后期處理。4.對細胞功能進行評估。5.增強生長和/或產(chǎn)量。6.生理反應性的更好對照。7.加強細胞內(nèi)介質(zhì)的檢測。某些應用可能需要添加生長因子和/或細胞因子。術語表:無血清培養(yǎng)基—無血清培養(yǎng)基無需添加血清,但可能含有離散的蛋白或大塊蛋...
2016 4-27
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胰酶使用注意及貼壁細胞的消化胰酶為類白色至微帶黃色的粉末;微臭,但無霉敗的臭氣;有引濕性;水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。在中性或弱堿性條件下活性較強,胰蛋白酶能使蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為蛋白胨,胰淀粉酶能使淀粉轉(zhuǎn)化為糖,胰脂肪酶則能使脂肪分解為甘油及脂肪酸,從而促進消化、增進食欲。胰酶主要用于消化不良,食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障礙,同時也適用于先天性胰功能不全、腹部手術和外傷胰腺切除導致的胰功能不全?;蛭唇?jīng)手術切除后天引起的胰功能不全及酒精中毒引起的慢性胰腺炎等。...
2016 4-25
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三聚氰胺ELISA檢測試劑盒說明書1.概述此試劑盒的原理是酶聯(lián)免疫測定法,這個試劑盒可用于一切樣品中三聚氰胺的定性或定量檢測。如果需要進一步測定可以利用HPLC,GC/MS技術。2.安全指導試劑盒標準中含有少量的三聚氰胺,另外,底物溶液中含有四甲基聯(lián)苯胺,終止液里含有稀釋的鹽酸。盡量避免不要和這些試劑接觸,如果這些試劑接觸到皮膚請馬上用水沖洗。3.存儲和穩(wěn)定性試劑盒應在4–8℃保存,在使用前試劑盒內(nèi)的所有試劑都要回溫到室溫(20-25℃)在有效期內(nèi)試劑可以一直使用4.原理酶聯(lián)免疫吸附測定法定量測定三聚氰胺殘留...
2016 4-18
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